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技術文章 / article
ATCC細胞株培養操作
原載自：m.chunqiuwuba.com[技術資料頻道] 2017-11-24 瀏覽次數：2340
ATCC細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。原代培養物經傳代成功后即為細胞系(cell line)， 由原先存在于原代培養物中的細胞世系所組成。
ATCC細胞株培養操作：
將凍存的ATCC細胞株從有干冰的包裝中取出，理解復蘇培養，或迅速轉移放置在液氧罐氣相層在——130°C以下的度存儲。
1、先準備好細胞培養皿或細胞株培養瓶，及產品說明推薦的相應細胞培養基。并在37°c水浴中預先溫熱細胞培養基
2、小心取出裝有細胞的凍存管，保持管蓋擰緊，將凍存管蓋一下的部分置于37°C水浴中并輕微的攪拌以幫助解凍。解凍過程應該盡快，大約短于2分鐘或待zui后一塊小冰晶體剛融化，就應該將細胞凍存管取出水浴。
3、在從水浴中取出的細胞凍存管表面噴灑70%乙醇配制的消毒劑，用于菌紙巾或紗布試干。之后的操作步驟都應該遵循在無菌條件下生物安全柜中嚴格操作。
4、小心擰干凍存管的頂部，將管內容物用1MI移槍轉移到9毫升培養基的無菌離心管中。離心5到7分鐘（125*g）.小心吸去上清液以去除抗凍劑（二甲基亞砜），避免丟失細胞沉淀。將細胞沉淀重懸于配好的*培養基中。將細胞懸液轉移到培養容器，輕輕搖晃使細胞均勻的分布。生長較慢的細胞株可重懸于5——8mI培養基并轉移到T125培養瓶。生長較快的細胞株可重懸于12——20mI培養基并轉移到T75培養瓶。
5、將細胞培養容器置于細胞培養箱，在溫度37°C二氧化碳濃度5%的培養條件下進行卵育。細胞培養24小時候后應在顯微鏡下觀察細胞株形態和生長狀況 。
ATCC細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質或標志的培養細胞。從培養代數來講，可培養到40-50代。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。對于人類腫瘤細胞，在體外培養半年以上，生長穩定，并連續傳代的即可稱為連續性株或系。
